（2）MS培养基的配制

　　根据表2进行计算，并将结果填入表中。请利用提供的母液和材料，以MS+ 0.01 mg/LNAA+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂，pH为5.8，配制培养基500ml，并均匀分装到12个培养瓶，不进行灭菌。（表2中浓度由参赛者按照大赛提供的母液标签填写）

　　表2 MS培养基配制

　　（2）MS培养基的配制

　　根据表2进行计算，并将结果填入表中。请利用提供的母液和材料，以MS+ 0.01 mg/LNAA+ 3%蔗糖+ 0.7%琼脂，pH为5.8，配制培养基500ml，并均匀分装到12个培养瓶，不进行灭菌。（表2中浓度由参赛者按照大赛提供的母液标签填写）

　　表2 MS培养基配制

母液	浓度	配制体积（ml）	母液吸取量（ml）	称取量（g）
大量元素				—
钙盐母液				—
铁盐				—
微量元素				—
有机物				—
萘乙酸				—
蔗糖			—
琼脂粉			—
写出灭菌操作步骤：

　　（3）马铃薯组培苗继代培养的无菌操作。

　　在30min内，按无菌操作规范要求完成试管苗的继代培养，每瓶转接15株苗，茎段长1-2cm，带1-2叶片，扦插到培养基中，均匀分布，无交叉污染等动作。

　　2．比赛时间

　　比赛时间为120分钟。

　　（三）比赛方式

　　比赛以团队方式进行，每省参赛学生2名，须为同校在籍学生。其中理论考试由1名学生参加，操作技能比赛为2名学生配合完成。

　　三、比赛命题及裁判

　　（一）比赛命题

　　理论部分由农业部人力资源开发中心组织专家命题。该项目比赛办法中规定的实践操作内容为技能试题。

　　（二）裁判

　　聘请相关专业职业技能鉴定高级考评员、行业企业专家、高等院校专业教师为裁判员。大赛裁判工作按照公平、公正、客观的原则进行。

　　四、比赛场地及设施

　　（一）比赛场地

　　1.理论知识考试在江苏农林职业技术学院计算机室进行。

　　2.技能比赛在江苏农林职业技术学院研发楼植物组织培养技能大赛场地进行。

　　（二）技能比赛设备及用具（每两人为一单元，共用1套）

　　1．MS母液配制

　　氯化钙（CaCl2.2H2O），碘化钾（KI）、萘乙酸(NAA)、电子分析天平（感量0.0001g）1台、电炉1只、电子天平（感量0.01g）1台、烧杯（200ml）3只、容量瓶（250ml）1只、容量瓶（200ml）1只、容量瓶（100ml）1只、玻璃棒3支、胶头滴管2支、洗瓶2只、蒸馏水5L、95%酒精1瓶、0.1mol/LHCl 1瓶、抹布1块、称量纸2包、卷纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个、白色实验工作服1件/人等。

　　2．MS培养基的配制

　　电磁炉1只、MS母液6瓶、琼脂粉1瓶、蔗糖1瓶、搪瓷杯（1000ml）1只、培养瓶12只、烧杯（200ml）1只、蒸馏水2L、洗瓶1只、量筒（50ml）1只、移液管（10ml）1支、移液管（5ml）5支、0.1mol/LHCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、pH试纸（5.0－7.0）1包、抹布1块、称量纸1包、卷纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个等。

　　3．马铃薯组培苗继代繁殖的无菌操作。

　　试管苗20瓶、培养基80瓶、双人单面工作台1台（带两个高温消毒器）、剪刀6把、镊子6把、酒精灯2只、无菌纸2包、喷壶2个、酒精棉1瓶、一次性口罩3只、记号笔2支等。

　　五、比赛规则和注意事项

　　（一）比赛规则

　　1．参加理论考试与操作技能考试的参赛学生必须持本人身份证与参赛证参加比赛。

　　2．参赛选手出场顺序、位置、比赛所用材料、工具由抽签决定，不得擅自变更、调整。

　　3．参赛选手提前15分钟检录进入赛场，并按照指定位号参加比赛。迟到15分钟者，取消比赛资格；比赛开始15分钟后，选手方可离开赛场。

　　4．植物组织培养项目选手应在比赛试卷或实物标签上填写比赛号。试卷（或实物标签）上不得有任何暗示选手身份的标记，否则取消成绩。

　　5．选手在比赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意。选手若需休息、饮水或去洗手间等，耗用时间计算在比赛时间内。

　　6．比赛在规定时间结束时，参赛选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延比赛时间。选手操作完成后，在《实际操作现场记录表》上签名确认，方可离开赛场。

　　（二）注意事项

　　1．参赛对象必须是在籍学生。

　　2．参赛选手须按规定的时间报到、比赛。

　　3．参赛选手不得穿有学校标识的服装。

　　4．比赛所用材料、仪器、工具均由承办单位提供。

　　5．遵守纪律，尊重评委，服从指挥。

　　六、成绩评定

　　理论知识考试和操作技能考核分别采用百分制计分，按理论知识占30%、操作技能占70%权重确定成绩。操作技能由该项目裁判员统一评分，称量、定容、PH测定终止举手示意裁判确认，否则该项操作不计分。考核内容与分值如下：

　　植物组织培养项目考核要点与分值

序号	考核内容		考核要点	分值
1	MS母液配制	计算	计算填空	10
		试剂称量	称量方法正确，操作规范、熟练。	10
		溶液配制	玻璃棒搅拌正确，试剂完全溶解，熟练定容且准确，贴好标签	10
		分工协作	分工合理，相互协作，完成速度快	5
2	培养基配制	计算	计算填空	8
		配制	琼脂粉完全溶解，定容准确，pH值测定、调节正确，熟练操作，	12
		分装	均匀分装，熟练操作，培养瓶表面洁净，贴好标签、标签内容准确	5
		分工协作	分工合理，相互协作，桌面整洁，完成速度快	5
3	无菌操作	无菌操作	无菌操作准备完全，熟练进行无菌操作，灭菌方式正确，接种速度较快，操作结束清理完全，标签书写准确	20
		分工协作	分工合理，相互协作，完成速度快（每瓶至少15苗）。	12
		文明操作与安全	操作文明、安全，工作台场地清洁干净，用具摆放整齐	3
合计分值				100

　　七、申诉与仲裁

　　1.参赛选手对不符合比赛规定的实验材料，有失公正的检测、评判、奖励，以及对工作人员的违规行为等，均可提出申诉。

　　2.选手申诉均须通过本代表队领队，在本赛项结束后1小时内以书面形式向大赛执委会仲裁组提出。仲裁组将认真负责地受理选手申诉，并将处理意见通知领队和当事人。

　　3. 大赛执委会仲裁组的裁决为最终裁决。

　　八、其他

　　本比赛办法与规则的最终解释权归农业技能大赛执行委员会。